Hey小伙伴们，今天给大家带来NR8383细胞的传代攻略，让你的细胞培养之路更加顺畅！🌟 细胞传代步骤 观察细胞生长：当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，就是传代的最佳时机。 清洗细胞：首先，弃掉25cm²培养瓶中的培养液，然后用PBS清洗细胞一次，确保细胞表面干净。 添加消化液：接着，添加0.25%的胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中。注意要倒置显微镜下观察，这样可以看到细胞的变化。 终止消化：待细胞回缩变圆后，迅速加入5ml完全培养液终止消化。这一步很关键，可以防止细胞过度消化。 吹打细胞：轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中。 离心：将离心管放入离心机，1000rpm离心5分钟，让细胞沉淀下来。 重悬细胞：弃掉上清液，用1-2ml完全培养基重悬沉淀的细胞。 分瓶传代：按1:2比例进行分瓶传代，将细胞悬液均匀分配到新的培养瓶中。 培养：最后，将新的培养瓶放入37℃，5%CO2细胞培养箱中继续培养。 小贴士 无菌操作：在整个过程中，一定要保持无菌操作，避免污染。 观察细胞形态：在显微镜下观察细胞时，注意细胞的形态变化，确保细胞健康。 离心速度和时间：1000rpm离心5分钟是推荐的操作，但具体可以根据实验室条件适当调整。 常见问题 细胞不脱落：如果细胞不容易脱落，可以适当增加胰蛋白酶的浓度或延长消化时间。 细胞状态不佳：传代后细胞状态不佳，可能是消化过度或培养基不合适，需要及时调整。 希望这些小贴士能帮助你更好地进行NR8383细胞的传代操作，让你的细胞培养更加顺利！如果有其他问题，欢迎在评论区交流哦~ 🌈🧪🔬