细胞冻存的致命误区，你中了几个？ 1、细胞状态不佳就冻存 ✅ 正确做法：冻存前确保细胞处于对数生长期（80%-90%汇合度），避免使用老化或过度生长的细胞。活力不足的细胞修复和抗损伤能力弱，易受低温、冰晶等因素伤害，复苏后大量死亡。 2、 细胞消化不当，导致冻存时损伤 ✅ 正确做法：使用温和消化酶，消化时间不宜过长，避免细胞膜损伤。同时消化也要彻底，避免细胞消化时间不足，用力吹打脱落导致细胞膜损伤。并添加足够量终止液终止消化。 3、冻存细胞悬液浓度过高或过低 ✅ 正确做法：推荐冻存密度：1×10⁶~5×10⁶ cells/mL（过低易死亡，过高易形成冰晶损伤）。冻存前用台盼蓝染色检测活率（>90%方可冻存）。 4、 复苏时操作不当，热休克或DMSO毒性 ✅ 正确做法：快速复苏（37℃水浴，摇晃冻存管1-2分钟内完全融化）。DMSO需尽快洗脱（融化后立即加入足够量完全培养基稀释）。避免反复冻融！建议1ml冻存液添加3ml完全培养基稀释。 5、长期储存时温度波动 ✅ 正确做法：-80冰箱减少开关，并只短期包3个月内保存。液氮罐保存的需要定期补充液氮，避免温度回升。使用温度监控系统（如无线液氮罐传感器）。 以下是我司经过2年研发，推出让细胞穿越时空的"生命方舟"的冻存液，让您的细胞冻存后实现存活率高达95%，快来加入我们吧！ 自配经典配方：货号CSP169 1、胎牛血清（FBS）+DMSO（二甲基亚砜），DMSO可降低冰点，减少冰晶形成。 冻存方式：（4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存） 商业化冻存液：货号CSP042 1、含 DMSO： 葡萄糖等各种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。 2、无血清细胞冻存液（无DMSO）：货号CSP207 无DMSO有机试剂成分，无需程序性降温。该冻存液中所含的独特的冷冻保护剂，不仅能替代传统冻存液的DMSO成分，降低对细胞的潜在毒性，还能在冷冻过程中延缓冰晶对细胞以及细胞间相互挤压的影响，有效减少冷冻过程中冰晶形成对细胞结构造成的损伤，此外，特殊冷冻保护剂具备优异的生物相容性，使细胞可在-80℃条件下长期稳定保存。 冻存方式：无需程序性降温，可直接转移到-80度保存或液氮保存。