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细胞培养中的污染鉴别与防治策略!

细菌污染是细胞培养中最常见的污染类型,因其生长迅速,肉眼和显微镜下均较易识别。细菌污染特点通常表现为: 培养基变化:细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到;受感染的培养物通常会发黄并变得浑浊,经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。 显微镜观察:细菌污染的细胞在显微镜下呈现黑色细条沙状,细菌的直径通常只有几微米,其形状多样,如球状、杆状和螺旋状等。在低倍显微镜下,细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间,在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。 异味:伴随异样气味,有时表面会有一层薄膜。 对细胞影响:细菌污染的细胞生长速度缓慢,形态逐渐变圆直至死亡‌。 2、真菌污染 真菌污染比细菌污染更难早期发现,因为培养基通常保持清亮透明,培养液一般不会变浑浊,但在显微镜下可以观察到各种形状的菌丝。低倍镜下很容易观察到苗丝,如丝状、管状、树枝状或链球状等。培养液中通常会有肉眼可见的絮状物。真菌污染后,细胞的生长速度会减慢,形态发生变化‌高倍镜下可以见到链状排列的菌珠污染严重时肉眼可见白色或黄色漂浮物。 3、霉菌污染 霉菌污染与真菌污染类似,早期难以察觉。特征包括: 培养基变化:出现絮状杂质,镜下可见细丝状团状漂浮物。多数来自实验服,并且具有季节性,像现在这种长蘑菇的季节很容易污染这种菌类。 细胞影响:细胞生长缓慢,状态变差,最终停止增殖。 4、支原体污染 支原体污染是细胞培养中最难检测的污染类型之一,因其不引起明显浑浊或pH变化。 显微镜观察:显微镜下无法观察到; 细胞影响:细胞生长速度明显减慢,形态变得瘦长,出现“拉丝”现象,背景出现“小黑点”‌ 5、黑胶虫污染: 黑胶虫污染在细胞培养中较为特殊,早期对细胞影响较小,但数量增加后会显著干扰细胞生长。特征包括: 显微镜观察:黑胶虫在显微镜下呈现为黑色颗粒状或片状,通常在高倍镜下观察时,这些黑色颗粒会进行“布朗运动”‌。