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细胞房科研人必看:H9C2培养中的实操技巧!

H9c2(2-1)是来源于胚胎BD1X大鼠心脏组织的原始克隆细胞系的亚克隆,具有骨骼肌的许多特性。该细胞系可用于心血管疾病的研究。该细胞表现出许多骨骼肌的特性,且该细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。目前H9c2(2-1)细胞已被广泛用于研究心脏生物学和疾病的各个方面。 H9c2(2-1)是原始克隆细胞系的亚克隆,该细胞系由Kimes .和Brandt .从胚胎BD1X大鼠心脏组织获得,并显示出骨骼肌的许多特性。 这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。 如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。 H9c2(2-1)细胞培养时存在少量圆形贴壁细胞,为正常的细胞增殖现象。细胞处于不同增殖周期,具体形态会有差异,例如分裂期细胞通常会变小变立体呈圆形甚至脱落,而分裂间期细胞会铺展比较开,这些都是正常增殖现象。细胞名称:H9C2大鼠心肌细胞 细胞别名:H9c2 (2-1); H9c2; H9C2 产品货号:ZQ0102 生长特性:贴壁生长 培养条件:DMEM高糖(品牌:中乔新舟 货号:ZQ-100)+10%FBS(品牌:中乔新舟 货号:ZQ500-A)+1%双抗(中乔新舟  货号:CSP006) 【传代培养】 该细胞为贴壁生长: 1、细胞有脱落情况时,将培养液转移到无菌离心管中,离心(125g,3~5分钟)1000-1200rmp收集悬浮细胞(漂浮细胞少,可能无沉淀,大部分在管壁上);轻柔去除培养基,等贴壁细胞消化收集在一起混匀接种。 2、贴壁细胞用PBS洗1~2次,每次3-5ml,添加1ml 胰酶(0.25% 含EDTA)到细胞瓶中,轻轻摇匀,使胰酶溶液铺满细胞表面,放入培养箱中。1-3min后取出到显微镜下观察,(若细胞无变化继续放入培养箱消化)一旦细胞变圆、轻拍瓶尾部大部分细胞开始脱落,当达到70-80%细胞漂浮脱落,立即加入5ml完全培养基(含10%FBS)中和。用移液管轻轻吹打6-8次,使细胞充分解离。 3、将细胞悬液转移到无菌离心管中,计数,离心收集细胞。用适量完全培养基重悬细胞沉淀,使细胞密度为每毫升0.6-2X105。将细胞悬液转至培养瓶中,静置于培养箱中。建议T25培养瓶添加5-7ml完全培养基,以后2-3天进行换液。 细胞培养 中乔新舟