1.实验目的

碘化丙啶（Propidium lodide,PI)是一种可以嵌合到双链DNA和 RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性。PI与双链 DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。 细胞内的DNA被PI染色后，可对细胞进行DNA含量测定，然后根据 DNA含量的分布情况，对细胞周期进行分析。PI 也能与 RNA 结合，因此需要用核酸酶处理来区分 RNA 和 DNA 染色。

由于细胞周期各时相的DNA含量不同，通常正常细胞的G1/GO期具 有二倍体细胞的DNA含量（2N),而G2/M期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N),而S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此，通过流式细胞仪结合PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时，可以将细胞周期各时相区分为G1/GO期、S期和G2/M期，获得的流式直方图 对应的各细胞周期可通过计算可获得各时相的细胞百分率 。

2.实验步骤

a）400g离心5min沉淀细胞，弃上清，加入2mL PBS洗涤一次；

b）400g离心5min,弃上清，1mL PBS重悬细胞，取1根流式管做好标记；

c）加入1 ml DNA staining solution，涡旋振荡5 - 10秒混匀，室温避光孵育30分钟,在最低上样速度下上机检测。

3.结果解读

如图为细胞周期的峰图，图中的两个峰分别为二倍体和四倍体峰，两峰之间的部分DNA含量处于二倍体和四倍体之间的细胞。所以，二倍体峰的细胞处于G0/G1期的细胞，两峰之间的细胞处于S期的细胞，四倍体峰的细胞处于G2/M期。